第二腰椎位于第一腰椎和第三腰椎中间，体表定位可以通过触摸双侧的髂后上棘判断。平行于髂后上棘的中线位置就是第四腰椎、第五腰椎间隙的平面，再往上摸两个椎间隙平面就是第二腰椎和第三腰椎平面，上面此节段就是第二腰椎的位置。
明确第二腰椎的位置，需了解正常腰椎解剖情况。正常腰椎共分为五节，通过体表定位法判断，从下往上摸到盆骨边上便是髂骨，最上沿的两边骨头连接处与脊柱骨中间交界位置，是第四腰椎和第五腰椎间隙的位置。此位置逐渐向上走，跨过两个凹陷的节段，摸到的凹陷位置就是第二腰椎和第三腰椎的椎板间隙，第二腰椎就在椎板间隙的上方。这种方法可帮助粗略定位第二腰椎，但是实际从解剖学的角度来说，第二腰椎是位于第一和第三腰椎的中间位置。
通常要通过影像学检查，如CT、X光片等，精确定位第二腰椎的位置。另外，第二腰椎的椎体也是腰椎病变常发病部位，例如腰椎压缩骨折、结核等，平时应注意保护。