骨化二醇和骨化三醇的区别，主要在于生理活性、临床意义等方面。骨化二醇是维生素D转化为骨化三醇的中间产物，不具有生理活性，而骨化三醇具有生理活性。
1、生理活性：维生素D包括维生素D3和维生素D2等，在人体内没有生理活性，经肝细胞微粒体羟化酶催化成骨化二醇，也不具有生理活性，再经过肾小管上皮细胞线粒体内的活性酶催化，最终生成骨化三醇，具有较强的生理活性；
2、临床意义：骨化二醇一般不用于临床治疗，且暂时没有相关药物。骨化三醇可以促进肠壁细胞合成大量钙结合蛋白，具有促进钙吸收、转运的作用。临床通常将骨化三醇作为补充钙剂的伴侣，可用于治疗退行性骨质疏松、慢性肾功能衰竭引起的骨营养不良、低钙血症等。骨化三醇通常不经过肝肾生成、代谢，尤其适用于肝肾功能不全的患者。此外，用药期间应监测血钙变化，以免长期用药导致血钙增高。