最可靠的湿热灭菌法是热压灭菌法，热压灭菌法是在高压的灭菌器内，利用高压水蒸汽杀灭微生物的方法。由于是在高压状态，蒸汽又是饱和蒸汽，产热量高、穿透力强，因此是最可靠的热压灭菌法，医学上常用的方法包括：
一、高压蒸汽灭菌，也就是上述的热压灭菌法，主要用于耐高温、耐高湿的医疗器械和物品的灭菌。
二、干热灭菌，用于高温下不损坏、不变质、不蒸发的物品，不耐湿热的器械，蒸汽或气体不能穿透的物品的灭菌。
三、环氧乙烷灭菌，多数不易用一般方法灭菌的物品均可用环氧乙烷消毒和灭菌，如电子仪器、光学仪器、医疗器械、书籍、文件、皮毛、化纤、塑料制品、木制品等。环氧乙烷灭菌是目前最主要的低温灭菌方法之一，还有过氧化氢低温等离子灭菌、戊二醛灭菌、过氧乙酸灭菌等。