维生素B12片的主要成分是维生素B12，维生素B12是水溶性的维生素，是维生素B族家族成员中的一员。维生素B12在体内转化为甲基钴胺和辅酶B12从而产生活性，甲基钴胺参与叶酸的代谢，缺乏时就会妨碍四氢叶酸的循环利用，从而阻碍胸腺嘧啶脱氧核苷酸的合成，使DNA的合成受阻，血细胞的成熟分裂将会停滞，因此就会导致巨幼细胞的贫血。
辅酶B12是促进脂肪代谢中的中间产物，可以参与三羧酸循环，人体缺乏的时候就会引起脂肪酸的代谢异常，以及相关物质的排泄增加，同时也可以影响神经髓鞘磷脂的合成，并且对维持髓鞘的神经纤维功能有非常重要的作用，缺乏的时候就会出现神经损害的临床表现。维生素B12片在临床上主要是用于巨幼红细胞性贫血，另外对神经系统也起到营养神经的作用。
